BRUCELLA


BRUCELLA

BACTERIE DE GRP 3 = PSM !!!
 

** QUIZ : TEST TES CONNAISSANCES AVANT OU APRES : ICI ☺ **

→ Bacilles/coccobacile Gram - , décoloration irrégulière. Polymorphes, immobiles non capsulés. Aérobie Strict, Oxydase + Catalase +

→agent de la brucellose = maladie animale transmise à l'homme = zoonose, anthropozoonose

 

 

4 Espèces : B.melitensis (ovins - caprins 80% des brucellose)     B.suis (suidés)

                   B. abortus bovis (bovins)                                              B.canis (canidés)

 

♦ HABITAT :

b animale = milieux professionnel.

Survit 32 jours en milieux ext, 125 jours milieux organiques humides, 135 jours milieux organiques secs (foin, étable.. et 180 jours dans le sang à +4°C.

Bovins, Ovins, Suidés, Canidés => danger sérieux pour le travailleur.

 

♦ POUVOIR PATHOGENE : maladie prof à déclaration obligatoire éradiquée depuis 2003

→ Brucellose animale : maladie de la reproduction

chez mâle = orchite = stérilité / chez femelle = infection utérus/foetus = avortement + infections des glandes mammaires = contamination lait

→ Brucellose humaine : fièvre de Malte

Les fièvres sont récurrentes (par intermittence). La bactérie est phagocyté par les macrophages et se developpe dans le phagosome (inhibe fusion lysosome/phagosome).

Libére des protéines dites de choc septique = phase aigüe / sepsis

Les modes de transmission :

- contact direct par voie cutanée 75%

- ingestion 25% lait cru, fromage frais...

- inhalation litières..

Les symptomes sont les suivants :

- Brucellose aigüe / sepsis : asthénie (fatigue), fièvre ondulente, arthralgie

- Brucellose subaigüe : infections ostéo-articulaires , neuroméningées

- Brucellose chronique : forme inapparente mais " fatigue dite patraquerie "

 

♦ DIAGNOSTIC : en fct du stade de la malade. Sérologie importante en phase chronique

→ Prélèvements : PSM !!!

- phase aigue = hémoculture

- phase subaigue = LCR, liquide articulaire.

 

→ Culture : bactérie exigeante !

- culture très lente 3/4 jours jusqu'à 3 semaines !

- culture recommandée en flacon d'hémoculture biphasique pour tous plvmts

- milieux spécifiques enrichis = gélose au sang frais, choco-PVX, BCYE.. à 35 ° C + 5/10% CO2

 

→ Caractéres biochimiques : Aérobie Stricte, Catalase + , Oxydase +, uréase +

 

♦ TECHNIQUE DE SERO-AGGLUTINATION :

Le diagnostic sérologique (dosage des Ac spé) est le plus fréquement utilisé mais seul le diagnostic bactério par culture et isolement du germe apporte une certitude !

Les diverses techniques de sérologie sont :

 

→ Séro-agglutination semi-quantitative = Test de Wright ( R° positive dès le 10e jours puis IgM diminue en 4/8mois) :

agglutination active directe en tubes, obtenue en mélangeant différentes dilution de sérum d'un patient avec une suspension antigénique de Brucella abortis inactivées / phénolées.

Permet le dosage des agglutinines anti-brucella de type IgM en présence d'une suspension de Brucella abortis inactivées.

TEST + = surnageant + présence de dépôt avec granulation franches à la remise en suspensions avec un Titre > ou = à 120 UI/mL

( la lecture se fait en comparation aux témoins + et  - avant et après la remise en suspension pour éviter de Faux positifs)

Test wright tubeTest de wright tubes

 

→ Sérodiagnostic qualitatif

agglutination sur lame = réaction à l'Ag au rose de Bengale à partir du sérum non dilué (IgG) et de souches de Brucella abortis inactivées colorées par le rose de Bengale.

La lecture se fait dans les 4 min, avec réalisation des témoins négatifs et positifs.

Mélanger une goutte de sérum à tester (IgG) avec une goutte des Ag de B.abortis inactivées par la chaleur et phénolées puis colorée au rose de Bengale.

TEST + = agglutination mais risque de faux-postifis d'où => SERO SEMI QUANTI = TEST DE WRIGHT

 

Test de wright

 

→ Test d'agglu sur lame  : possible qu'en phase aigüe !!

agglutination rapide sur lame avec un immunsérum monospécifique anti-Brucella melitensis et abortis

 

→ immunofluorescence indirecte 

Sur une lame avec Ac déposé le sérum comportant les Ag => résultat + fluo , - non fluo

 

→ ELISA = technique expliquée ici !

 

Brucella melitensis

 

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